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  • 教你成為平淡無奇的WB小能手—凝膠制備

    2021-02-26 WB實驗流程●樣本采集保存,蛋白提取相關知識,請●蛋白定量和蛋白變性相關知識,請現在正式進入跑膠環節,這一次,讓小編帶您總結一下制膠相關的知識點:SDS-凝膠電泳系統采用的是不連續性系統,上層為濃縮膠(或積層膠),下層為分離膠,先配制分離膠,濃縮膠pH6.8,可以通過甘氨酸和和氯離子之間形成的電壓對蛋白樣品產生壓縮,從而使蛋白樣品壓成一條狹窄的條帶,處于同一條線上;分離膠pH8.8,與甘氨酸的pka接近,從而使不同分子量的蛋白產生不同的泳動速度,從而使不同分子量的蛋白分開。分...
  • 乙酰膽堿酯酶測定試劑盒的測定原理是什么?

    2021-02-04 乙酰膽堿酯酶(AChE)是可將神經遞質乙酰膽堿(ACh)水解為乙酸和膽堿的一類酶。AChE位于突觸間隙中,通過降解ACh來終止突觸傳遞,從而使得膽堿神經元在激活后回復到靜息狀態。AchE活性的改變可能是由于在某些種類的殺蟲劑條件下暴露所造成的,在這時候這些殺蟲劑起到了膽堿酯酶抑制劑的作用。AChE的抑制劑也可用于治療如癡呆在內的某些疾病。乙酰膽堿酯酶測定試劑盒具有測量敏感、準確、操作簡便等特點,只需加入單一反應試劑,然后室溫下分別在反應后的2分鐘和10分鐘讀取儀器數據即可。可...
  • 教你成為平淡無奇的WB實驗小能手—樣本制備篇(續)

    2021-01-29 WB實驗流程樣本制備的步驟關于樣本采集和保存,蛋白提取的相關知識和技巧請查看:接下來,讓小編帶您總結關于蛋白定量和蛋白變性相關的知識點:一蛋白定量測定蛋白常用的方法有Bicinchoninicacid(BCA)法、Lowry法和Bradford法(考染法)1.BCA法的測定原理是蛋白質將銅離子還原成亞銅離子,后者在堿性溶液中與BCA結合生成紫紅色結合物,該復合物在562nm處有吸光值且與蛋白質濃度成正相關性,據此可測定蛋白質濃度。考馬斯亮藍在游離狀態下呈紅色,大光吸收在488...
  • 定位重塑型納米凝膠介導共遞送抗血管藥物自噬抑制劑,實現腫瘤的協同治療

    2021-01-29 腫瘤是一種復雜難治的疾病,對人類健康存在重大威脅。當腫瘤體積超過2-3mm3時,腫瘤的增殖、轉移與擴散主要依靠自身的血管系統來提供必要的氧氣和營養物質。而在缺乏血管的情況下,腫瘤具有自限性生長的特點。因此,將腫瘤血管作為靶點,抑制它的形成或破壞其存在,直接切斷腫瘤增殖與轉移的營養通道,是一個有吸引力的治療策略。目前,根據作用機制的不同,血管靶向藥物(VTAs)主要包括兩大類:血管生成抑制劑(AIs)和血管阻斷劑(VDAs)。在VDAs中,康普瑞汀(CA4)作為常用的小分子血管...
  • 在使用維生素B6測定試劑盒時,要注意的細節有哪些?

    2021-01-27 維生素B6(VitaminB6)又稱吡哆素,其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺,在體內以磷酸酯的形式存在,是一種水溶性維生素,在細胞中參與多種蛋白質和氨基酸的代謝,對生物體具有極其重要的作用。測定的原理是:維生素B6與4-氨基安替比林在強氧化劑作用下生成穩定的黃色化合物,在390nm有特征吸收峰。可用于用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。維生素B6測定試劑盒在使用時,要注意以下幾點:1、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。2、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,...
  • 什么是重組人胰島素?

    2021-01-25 胰島素是由朗格漢斯胰島β細胞受內源性或外源性物質如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸等的刺激而分泌的一種多肽激素。重組人胰島素是將人的胰島素DNA的片段裁剪到大腸桿菌身上,讓大腸桿菌分泌出與人所分泌的一模一樣的胰島素。因為使用了基因重組技術,所以也叫重組胰島素。重組人胰島素為白色或類白色的結晶性粉,在水、乙醇中幾乎不溶,在稀鹽酸和稀氫氧化鈉溶液中易溶,是一種作用于內分泌系統的降糖藥物,屬于胰島素。重組人胰島素與天然胰島素有相同的結構和功能。重組人胰島素的作用是:調節糖代謝,同時促進肝...
  • CCK-8試劑做實驗時有哪些需要注意的事項

    2021-01-25 今天我給大家說說用CCK-8試劑做實驗時的注意事項:1.第一次做實驗時,建議先做幾個孔摸索接種細胞的數量和加入CCK-8試劑后的培養時間。2.接種時注意細胞懸液一定要混勻,以避免細胞沉淀下來,導致每孔中的細胞數量不一致。3.培養板周圍一圈孔培養液容易揮發,為減少誤差,建議培養板周圍的四邊每孔只加培養基。4.建議采用多通道移液器,減少平行孔間的誤差,加CCK-8時,建議斜貼著培養板壁加,不要插到培養基液面下加,容易產生氣泡,干擾OD值。5.若細胞培養時間較長,培養基顏色或pH發...
  • 敲黑板 這些免疫組化FAQ助您攻破實驗難點

    2021-01-22 免疫組織化學(簡稱免疫組化)是組織化學的一種,它是利用已知的特異性抗體與抗原能特異性結合的特點,通過化學反應使標記于結合后的特異性抗體上的顯示劑,如酶、金屬離子、同位素等,顯示一定的顏色,并借助顯微鏡觀察其顏色的變化,從而在抗原抗體結合部位確定組織、細胞結構的化學成份或化學性質。實驗過程包括切片制作(固定,脫水,透明,包埋,切片,貼片,烤片),脫蠟,水化,阻斷,抗原修復,封閉,一抗孵育,二抗孵育,顯色,復染,封片,分析。IHC是一項具有挑戰性的應用技術,應用過程中常出現各種問...
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